作者:赵银环，林梅，张艳，纪晓坤，王蕊，吴家宁，吴娟，杜芸，王珩
作者单位:医院癌检中心
近年来细胞块技术在细胞病理学中的地位日渐突出。细胞块技术是将浆膜腔积液的样品离心，细胞和微小组织块被高度浓缩后用固定剂凝聚、石蜡包埋，再制成切片。细胞块主要用于免疫细胞化学和基因检测等，对组织类型的鉴别有一定的帮助，从而提高细胞病理诊断的敏感性。现有的细胞块技术主要有琼脂包埋法、血浆凝血酶法和鸡蛋清凝集法等。这些方法或操作复杂或成本较高，其制片和染色效果不稳定，组织块不完整，包埋时组织比较散碎，严重影响制片。本文现介绍一种简便有效，费用低廉，组织块比较完整的细胞块制作方法。
1．材料与方法
1．1材料
1．1．1耗材及设备一次性试管，一次性吸管，尖头硬签，冰醋酸，10%中性福尔马林，95%乙醇，石蜡，低速离心机，震荡仪，全自动脱水机，包埋机，切片机。
1．1．2标本胸腔、腹腔、心包腔、盆腔积液以及腹腔手术中的冲洗液。血性标本需抗凝。样本量最好在～ml以上，新鲜标本应立即送检，延迟送检的样本应放入冰箱内4℃冷藏。
1．2方法积液样本先用细胞采集器过滤1/2后，常规细胞学涂片，然后将剩余标本全部离心:0r/min离心5min，用吸管吸干上清液；若为血性样本，应加入冰醋酸乙醇5ml(25%乙醇∶冰醋酸=19∶1)振荡，再离心沉淀。用吸管吸干上清液；加入10%中性福尔马林5ml，混匀(如果沉淀量极少，应放入1ml的尖头离心管内)；0r/min离心5min；吸干上清液，沿管壁轻轻加入95%乙醇5ml，混匀，0r/min离心5min后过夜；用吸管吸干上清液，然后用尖头的硬签轻轻将沉淀物挑出(若沉淀物为白色则染伊红上色)将包埋纸用95%乙醇浸润后将沉淀物包好，放入脱水盒。10%中性福尔马林固定2h。然后脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、切片。
2．结果
采用上述方法制作的细胞块，完整，不易碎(图1、2)，方便包埋，不用支架，染色时无背景着色，细胞清晰(图3、4)，使绝大多数涂片不能解决的问题通过细胞块切片进行辅助检查，如各种特殊染色及免疫组化染色或原位杂交等，最重要的是细胞块可永久保存，解决细胞涂片不能复制的缺点。
图1细胞块包埋比较完整
图2细胞块完整的HE切片
图3染色无背景着色
图4胸水转移性腺癌细胞块切片，结构清晰
3．讨论
细胞块在脱水之前先用10%中性福尔马林固定2h，再进行脱水，首先对标本进行预固定，再脱水，更容易形成组织块。注意梯度乙醇脱水，二甲苯时间不宜过长，20min×2，时间太长，细胞块较脆，影响切片。细胞块浸蜡要彻底，温度不超过65℃，这样制作出的细胞块组织比较完整，不松散。具体操作可在全自动脱水机上另设定程序，待常规活检标本结束后运行。
目前常用琼脂法、血浆凝血酶凝集法来制作细胞块，其制作过程繁琐，容易受环境温度的影响，易变性；鸡蛋清的效果也不稳定，而且有背景着色。作者利用10%中性福尔马林凝固蛋白和95%乙醇使蛋白质变性、硬化组织的作用，采用10%中性福尔马林凝固－乙醇固定过夜－10%中性福尔马林再固定的方法，制作细胞块简便易行，包埋与切片质量优良，值得推广。
参考文献（略）
本文转自《临床与实验病理学杂志》JClinExpPathol-Apr;31(4)
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